临床检验技师临床免疫学中的知识:荧光
导语:所谓“免疫”原由拉丁字“immunis”而来,其原意为“免除税收”(exceptionfromcharges), 也包含着“免于疫患”之意。免疫学是研究生物体对抗原物质免疫应答性及其方法的生物-医学科学。一起来看看相关内容吧。
1.荧光:
荧光物质吸收激发光的能量后,使原来处于基态的电子跃迁到激发态,当其回复至基态时,激发态的电子以发射光的形式释放出能量,这种发射光称为~。
①发射光谱:是指固定激发光波长,在不同波长下所记录到的样品发射荧光的谱图
②激发光谱:是指固定检测发射光(荧光)波长,用不同波长的'激发光照射样品得到的荧光的谱图。
③荧光效率:是指荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率,与发射荧光光量子的数值成正比。
荧光效率=发射荧光的光量分子数(荧光强度)/吸收光的光量子数(激发光强度)
④荧光猝灭:荧光分子的辐射能力在受到激发光较长时间的照射后会减弱的现象。
2.荧光色素:
异硫氰酸荧光素FITC,黄绿色荧光,应用最广泛。
RB200:四乙基罗丹明,橘红色。
PE:藻红蛋白,红色,流式荧光免疫技术中PE与FITC可用于双标记免疫荧光染色。
3. 荧光显微技术原理
原理:又称荧光抗体技术,采用荧光素标记抗体与标本片中组织或细胞抗原反应,经洗涤分离后,在荧光显微镜下观察呈现特异性荧光的抗原抗体复合物及其存在部位,借此对组织细胞抗原进行定性和定位检测或对自身抗体进行定性和低度检测,此技术亦称荧光免疫组织化学技术。
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