口腔執業助理醫師考點:基因工程基本原理
基因工程(genetic engineering)又稱基因拼接技術和DNA重組技術,是以分子遺傳學為理論基礎,以分子生物學和微生物學的現代方法為手段,將不同來源的基因按預先設計的藍圖,在體外構建雜種DNA分子,然後導入活細胞,以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產新產品。基因工程技術為基因的結構和功能的研究提供了有力的手段。下面YJBYS小編就來具體説説基因工程基本原理吧。
基因工程根基事理一個完整的基因克隆過程應蒐羅目的基因的獲取,克隆基因載體的選擇與刷新,目的基因與載體的'毗連,重組DNA分子導入受體細胞,篩選出含感樂趣基因的重組DNA轉化細胞。實現上述過程需要一些主要的工具酶,如限制性內切核酸酶毗連酶等。限制性內切核酸酶是一類識別DNA特意序列的內切核酸酶。
①目的基因的獲取外源基因又稱目的基因,來歷於幾種路子化學合成、酶促合成cDNA,製備的基因組DNA及PCR手藝。細菌質粒、噬菌體和一些病毒DNA均可被刷新成基因克隆的載體。
②基因載體的選擇與構建可作為基因載體的DNA分子有質粒DNA、噬菌體DNA和病毒DNA,它們經恰當刷新後仍具有自我複製能力,或兼有表達外源基因的能力。
③外源基因與載體的毗連毗連體例有黏性結尾毗連、平端毗連和人工接頭毗連等。
④重組DNA導入宿主細胞外源DNA與載體在體外毗連成重組DNA分子,需將其導入宿主細胞。隨受體細胞發展、增殖,重組DNA分子得以複製、擴增。
⑤重組體的篩選剖斷哪一菌落或嗜菌斑所含重組DNA分子確實帶有目的基因,即可獲得目的基因的克隆,這一過程即為篩選或選擇。
⑥克隆基因的表達在原核或真核表達系統中進行表達,獲得所需要的卵白質。
例題(單選)在分子生物學規模中,分子克隆主若是指
的年夜量複製 的年夜量剪切 的年夜量複製 的年夜量剪切 E.反轉錄酶
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