2017年臨牀檢驗基礎知識:臨牀免疫學檢驗
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1. 免疫防禦(對外)免疫自穩(防自身免疫病)免疫監視(防腫瘤)。
2. 標記免疫技術應用最多,自動化是免疫學檢驗發展趨勢。
3. 抗原的表位至少有二種方式:順序或線性表位,三維結構的構象表位。
4. 天然抗原絕大多數是胸腺依賴性抗原(TD-Ag)。超抗原被T細胞識別時雖然要與MHCⅡ類分子結合,但不受Ⅱ類分子的限制,可以直接活化T細胞而且效率高。抗體由漿細胞產生。抗體分子上VH和VL是抗原結合部位,CL,CH1是遺傳標記所在,CH2有補體結合點,CH5能固定組織細胞,CH3和CH4還參加Ⅰ型變態反應。免疫學中常用木瓜酶和胃蛋白酶。
5. 免疫球蛋白的血清型有:同種型(正常個體都有)同種異型(只存在同種的某些個體中)獨特型(某一個體獨有的'。獨特性網絡在免疫應答的調控中起重要作用)。
6. 天然IgG分子無活性。IgM(五聚體,天然凝集素和冷凝集素,是B細胞膜上主要表面膜Ig)激活補體能力最強,IgG(單體,電泳最慢,再次免疫應答的主要抗體)至少要兩分子。0.1mol/L 2巰基乙醇能破壞IgM但不破壞IgG,可以區分它們。
7. 母乳中的分泌型IgA提高了嬰兒出生後4~6個月內的局部免疫屏障,常稱為局部抗體。
8. 人類重鏈基因位於14號染色體上,K基因位於第二號染色體上。
9. 參與補體激活經典途徑的固有成份按先後為C1,C2……C9,C1由C1q,C1r,C1s,三種組成。滅活的補體在片在符號前加i,有酶活性的上加一橫。
10. 補體大多是糖蛋白多屬β球蛋白,C1q,C8是γ蛋白。C1s,C9是α球蛋白。C3含量最多,C2含量最少。替代途經的激活物主要是細胞壁成分。
11. 補體清除免疫複合物的方式:吞噬調理,免疫粘附,免疫複合物抑制。
12. 編碼人C4,C2,B因子的基因在第六染色體短臂上與MHC的基因相鄰,命名為Ⅲ類組織相容性基因。產生補體主要是肝臟主要是巨噬細胞。
13. 已發現的歸巢受體有:CD44,LFA-1,VLA-4,MEL-14/LAM-1等。CD2表達於全部T細胞和NK細胞。CD3表達在全部T細胞,CD4(輔助性T細胞)/CD8(細胞毒性T細胞)相互關聯但意義不同是T細胞亞羣的表面標誌。
14. SIg的功能是作為B細胞表面的抗原受體可與相應抗原特異性結合並將抗原內攝處理。MHCⅡ是輔佐細胞(AC)遞呈抗原的必須物質是輔佐細胞(有單核吞噬,樹突狀,B細胞)的標誌。明確的白介素有15個,IL-2主要由T細胞(CD4+)受抗原或絲裂原刺激後產生,15KD,113糖蛋白。
15. Ⅱ型干擾素又稱免疫干擾素或IFNγ,主要由T細胞產生。腫瘤壞死因子:TNFα:由細菌脂多糖活化的單核細胞產生引起出血壞死也稱惡病質素,TNFβ:由抗原或絲裂原刺激的淋巴細胞產生有腫瘤殺傷和免疫調節功能又稱淋巴毒素。
16. 紅細胞生成素(EPO)是糖蛋白,30~39KD,主要由腎小管內皮細胞合成也可由肝和巨噬細胞產生。
17. 人類MHC稱為HLA複合體,位於第六對染色體的短臂上。其多態性為復等位基因所致,當羣體中位於同一位點的等位基因多於兩種時為復等位基因,HLA的遺傳特點:單倍型,共顯性,連鎖不平衡。Ⅰ和Ⅱ類MHC分子是引起同種異體移植排斥反應的主要抗原。
18. 當抗原遞呈細胞向免疫活性細胞遞呈抗原時,免疫活性細胞在識別特異性抗原時,必須識別遞呈細胞的MHC抗原稱為MHC限定性。
19. HLA是體內最複雜的多態性基因系統。抗原-MHCⅡ類分子複合物與T細胞受體的結合是使Th細胞活化的首要信號。
20. 細胞免疫的效應方式有:細胞毒,遲發超敏。
21. 體液免疫以血清中有循環抗體為特徵。
22. 炎症細胞有:中性,肥大,嗜酸,嗜鹼,血小板,內皮。炎症介質:血管和平滑肌收縮介質,趨化因子,酶類,蛋白多糖。免疫炎症類型:IgE介導,免疫複合物,細胞,皮膚嗜鹼細胞型。
23. 抗原抗體結合基於結構互補與親和性。由一級結構決定。結合力有:電荷吸引,範德華力,氫鍵,疏水性作用力。
24. 常用佐劑有:氫氧化鋁,明礬(弗氏)是目前動物免疫中最常用的
25. 抗血清保存:4℃,低温,冰凍乾燥。
26. 抗體特異性純化有:親和層析,吸附法。
27. 特異性鑑定有:效價,特異性,純度,親和力。
28. 脾淋巴細胞特徵是抗體分泌功能和能在選擇培養基中生長,骨髓瘤細胞則可無限分裂既永生性。細胞融合的選擇培養基有三成份:次黃嘌呤(H)氨甲蝶呤(A)胸腺嘧啶核苷(T)稱為HAT培養基。
29. 液體沉澱試驗有:抗原稀釋法和抗體稀釋法及方陣滴定法。
30. 免疫固定電流常用於M蛋白的鑑定
31. 補體結合試驗中5種成份分三個系統(反應,補體,指示)不溶血為陽性。
32. 常用的標記酶有辣根過氧化物酶(底物為鄰苯二胺,四甲基聯苯胺)鹼性磷酸酶(底物為磷酸酯)。
33. 抗體制備常用二醛法及過碘酸鹽法。
34. RIA(放免)核素標記抗原,競爭抑制,2~3個數量級,標記物限量。
35. IRMA(免疫放射)核素標記抗體,非競爭結合,3個數量級以上,標記物過量。
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