2017檢驗技師考試化學檢驗:孕酮(P)的主要功能與檢測
導語:孕酮(progesterone,P)是21C類固醇激素,由膽固醇經孕烯醇酮通過異構酶轉化而成。在非妊娠婦女,卵巢中的卵泡膜細胞產生P,妊娠期間,P則主要由胎盤合體滋養細胞層分泌,故血中P水平主要與胎盤重量及血液灌注量相關。
孕酮(P):女性主要由卵巢和胎盤產生。
孕酮的主要功能是促進子宮內膜增厚,腺體增生,為受精卵植入做準備。
從孕酮濃度的升降可以推測卵巢濾泡和黃體的活動,因此血液中孕酮測定在臨牀上用於監測未懷孕婦女的排卵和黃體的正常功能,孕酮療法監控及早期妊娠的評價等,在判斷黃體功能狀態上具有特別重要的意義。對不懷孕婦女和反覆自然流產婦女可幫助查找原因。在月經周期中,孕酮的濃度:濾泡期:0.14~1.61μg/L.排卵期後明顯上升,黃體期達:2.41~31.2μg/L,並與血中E2的增加平行。
妊娠足月時可高達:150~200μg/L.血清孕酮的升高:見於葡萄胎、輕度妊娠高血壓綜合徵、糖尿病孕婦、多胎、繼發性高血壓、先天性17-a羥化酶缺乏症、先天性腎上腺增生、卵巢顆粒層膜細胞瘤、卵巢脂肪樣瘤。
孕酮的降低:見於先兆流產、黃體功能不良、胎兒發育遲緩、死胎、嚴重妊娠高血壓綜合徵。
在月經週期第18~26天,測三次血P,如均小於15.9nmol/L(5ng/ml)可診為黃體功能不健。
注意事項
1、標記品和標準品均由無水乙醇配製,容易揮發,應將蓋子塞緊,貯於4℃冰箱。
2、抗血清稀釋成母液後應存放在4℃,切勿放-20℃低温處,以免反覆凍融,降低抗血清效價。
3、明膠、活性炭、葡聚糖等試劑應放在陰乾燥處。
4、0.1% GPS在夏天,即使放在4℃,也很容易變質,最好一次配量不要太多。如發現明顯混濁、發臭等變質現象,應予重配。
5、在進行B、F分離時,由於DCC時樣品需保持恆定的'接觸吸附時間,所以一批加樣管數不可能太多,時間不能太長,控制在3~5min內加完,待離心分離後,再加第二批。
6、在吸取活性炭溶液(DCC)時,必須保證DCC溶液的充分混勻,以免因DCC濃度的不均而影響分離效果。
7、抽提用CH2Cl2和配製用的無水乙醇必須重蒸後使用。
檢查過程
1、標準曲線製作:分別為0,10,20,50,100,200,400pg(復管),60℃水浴壓縮空氣吹乾,加補孕酮11000dpm/20μl吹乾,各管加1∶5萬0.2ml抗體,4℃恆温過夜,次日加5g/L GPS 0.1ml,2.5g/L DCC 0.5ml,4℃放置10min,3000r/min離心10min吸出上清液0.4ml,加到8ml閃爍液中,混旋1min,避光放4h後用液爍儀測量。
另取四管,各加3H-孕酮11000dpm/20μl,吹乾,加1g/L,GPS其中二管作總脈衝(T)。另二管作非特異性測定管(BN%),BN%DCC分離法同標準曲線製作。
2、未知樣品的檢測:孕婦取血漿0.05ml或0.1ml,未孕婦或男性取0.2ml,於具塞試管中用重蒸餾水補足劑0.5ml,加0.1mol/L NaOH0.2ml,重蒸二氯甲烷5ml,抽提5min,靜置,棄去上層液,二氯甲烷用蒸餾水洗2次,每次1ml,清洗,1500r/min離心3min,吸取二氯甲烷抽提液雙份1ml,置45℃水浴蒸乾,加3H-孕酮11000dpm/10μl,吹乾,加1∶5萬抗體0.2ml,以下操作與標準曲線相同。
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