高中生物實驗分析之四步分析法
1.1第一步:取材分析
正確取材是實驗成功的第一步。有的學生實驗失敗的原因,往往是取材不正確而引起的,因而在實驗分析時,要首先考慮取材是否正確。例如,實驗一“觀察植物細胞的有絲分裂”(以下簡稱“實驗一”)中,準確切取洋葱根尖生長點部位,是實驗成功的前提。一些學生製成的裝片中往往看不到或看到很少的分裂相細胞,就是因為切取部位正確導致的,即沒有選準根尖的生長點部位。實驗二“觀察植物細胞的質壁分離和復原”(以下簡稱“實驗二”)中,取材部位應該是在新鮮的洋葱鱗片葉外表皮的紫色較深處。而在內表皮或紫色很淺的部位取材,往往觀察不到或僅有很少紫色液泡。實驗三“觀察根對礦質元素離子的交換吸附現象”(以下簡稱“實驗三”)中,剪取的是有活性的根,如果是死根、爛根,則觀察不到預期的結果。實驗四“葉綠體色素的提取的提取和分離”(以下簡稱“實驗四”)中,選取的時片要肥厚、色濃,而老葉、發黃的葉子則不能選齲
1.2第二步:藥品與試劑分析
藥品與試劑的量、濃度、純度等都是影響實驗正確結果的重要因素,要逐一檢查,不能忽視。
1.2.1關於量的問題。有些實驗對藥品與試劑的量有一定的要求,如實驗四中,丙酮、層析液的量就要按規定使用:提取5g葉片中的色素,用2ml丙酮是適中的,若丙酮過多,會使色素濃度降低,減少濾紙條上色素的量,使分離效果不明顯;若丙酮少了,色素提取又不充分。色素分離時,向燒杯中例入層析液時,其量的標準是液麪不能超過1cm(距燒杯底),否則將沒及濾紙條上的濾液細線,色素就迅速溶解到層析液中去了,結果在濾紙條上得不到相應的色素分離圖譜。
1.2.2關天濃度問題。實驗中,規定的濃度,都是人們經過多次試驗後,認為最適合的。實驗員在實驗前配製藥品與試劑時,濃度要配準,否則將會影響學生實驗。如蔗糖溶液濃度較高時(高於30%),會使細胞因發生強烈質壁分離而失水過多,細胞死亡,不能復原。亞甲基藍溶液在配製時,要求更高,濃度高一點點,就會影響根的活性。
1.2.3關於純度問題。有的實驗如實驗三對試劑的純度有蔣高的要求,如果所用蒸餾水中混入雜質陽離子,或用自來水代替,則漂洗時,不僅洗去了浮在根細胞表面的亞甲基藍陽離子,而且也會把吸附在根細胞表面的亞甲基藍陽離了交換下來;在對比實驗中,含雜質陽離子的蒸餾水也會變藍。
1.3第三步:步驟及操作分析
步驟及操作是否正確是影響實驗結果的主要因素,故應重點分析,主要有以下三種情況。
1.3.1漏做某個實驗步驟。實驗步驟不能少,如實驗一中,根尖用10%鹽酸解離後,若不經漂洗直接染色,則染色效果極差,因為根尖上附着的鹽酸將和鹼性染料起中和反應,從而影響着色;製片時,用鑷子尖把根尖開碎,這一步也易漏掉。實驗三中根經亞甲基藍染色後,若不用蒸餾水反覆沖洗,在後面的對比實驗中,蒸餾水也將變藍。
1.3.2操作方法錯誤。在具體操作某個步驟時,沒有按規定的操作方法做,肯定會影響實驗結果。如臨時裝片製作時,有的'學生將蓋玻片直接放在清水滴上,這樣製成的裝片中,氣泡較多,嚴重影響觀察。實驗二中,應用鑷子撕取洋葱表皮,而不少學生是用刀片削或挖,以至取出的表皮較厚,這樣在顯微鏡下也就看不到單層細胞。
1.3.3操作不嚴格。如解離、染色時間不夠,漂洗的時間或次數不足。製作洋葱表皮臨時裝片時,未將清水滴中捲起的表皮平展開來;做質壁分離復原實驗時,滴入清水的次數少,濾液細線劃得不細不齊都會對實驗果有一定的影響。
1.4第四步:顯微鏡的使用分析
需用顯微鏡的實驗,有時會因為顯微鏡的操作,鏡頭污染等問題,而影響觀察,看不到已經出現的現象或結果。顯微鏡的操作要按一定的程序進行,如對光程序、高倍鏡觀察程序等。有的學生不按程序操作,結果既耽誤了時間,又觀察不到相應的結果,而且易損壞顯微鏡。例如常有學生在用高倍鏡觀察時,把蓋玻片壓碎了,弄髒了鏡頭,就是由於這些學生在下降鏡筒時,眼睛看的是目鏡而不是物鏡,這樣,鏡筒下降到什麼位置就不知道了。正確的程序應該眼睛看着物鏡,同時下降鏡筒,讓物鏡接近裝片,然後眼看目鏡、調節細準焦螺旋直至觀察到清晰物像。此外,目鏡或物鏡頭被嚴重污染、焦距沒有調好、放大倍數不夠、視野較暗、標本不在通光孔的中心位置等諸多因素,都會直接影響觀察。
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