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檢驗技師考點:熒光色素

許多物質都可產生熒光現象,但並非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光並能作為染料使用的.有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有:

檢驗技師考點:熒光色素

1.異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)為黃色或橙黃色結晶粉末,易溶於水或酒精等溶劑。分子量為389.4,最大吸收光波長為490——495nm,最大發射光波長520——530nm,呈現明亮的黃綠色熒光,結構式如下:有兩種同分異結構,其中異構體Ⅰ型在效率、穩定性、與蛋白質結合能力等方面都更好,在冷暗乾燥處可保存多年,是應用最廣泛的熒光素。其主要優點是:①人眼對黃綠色較為敏感,②通常切片標本中的綠色熒光少於紅色。

2.四乙基羅丹明(rhodamine,RIB200)為橘紅色粉末,不溶於水,易溶於酒精和丙酮。性質穩定,可長期保存。結構式如下:最大吸收光波長為570nm,最大發射光波長為595~600nm,呈橘紅色熒光。

3.四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC)結構式如下:最大吸引光波長為550nm,最大發射光波長為620nm,呈橙紅色熒光。與FITC的翠綠色熒光對比鮮明,可配合用於雙重標記或對比染色。其異硫氰基可與蛋白質結合,但熒光效率較低。