自然杀伤细胞活性临床意义
K细胞主要分布在腹腔渗出液,外周血、脾脏中;NK细胞主要分布在骨髓、外周血和脾脏中。临床主要用于肿瘤、病毒感染、寄生虫感染、自身免疫和移植免疫等病人,检测其K、NK细胞杀伤功能,在维持和调节特异性免疫中起重要作用。
自然杀伤细胞活性注意事项:
(1)要求效/靶细胞比为100∶1,若比>100∶1,自然杀伤率不呈对数增加。且标本用量亦大。
(2)标记靶细胞放置时间不宜过久。因随时间延长死细胞增加,自然释放率欠准确。
(3)标记的125IUdR浓度要合适,要求125IUdR的放射性浓度为1.11×107Bq/ml,如浓度过低,标记率自然杀伤细胞活性检查过程:
(1)效靶细胞作用:将分离好的淋巴细胞悬液(效应细胞)和标记的K562细胞(靶细胞)按100∶1的比例加入平底塑料试管中,按表1操作,同时设自然释放管(作为对照管),每个标本作了3个复管,最后用培养液使每管增至1ml,1500r/min离心,促进效靶细胞结合,置37℃、5%CO2孵箱内孵育18h。
(2)酶促反应:取出孵育试管,弃去各管上清液,剩下的.细胞加一定浓度(2.2g/L)胰蛋白酶和DNA酶各0.1m1,混匀后37℃水浴30min,促使被攻击的靶细胞释放125IUdR,随后各管立即加入0.8mlHank液终止酶促反应。混匀后1500r/min离心2min。
(3)测放射强度和计算:用γ型计数器分别测各管(上清和细胞管)cpm值,按下式计算;
自然杀伤细胞活性不适宜人群:
造血功能减低的人如白血病、各种贫血、骨髓增生异常综合症等患者或血小板减少的人抽血时应注意,不宜多抽或频繁抽血。
自然杀伤细胞活性不良反应与风险:
1.抽血结束后,不要按揉针孔部位,以免造成皮下血肿。如果抽血处有小片青淤,轻微触痛,请不要慌张,可过24小时后再做热敷,以促进淤血吸收。一般的小量淤血会在3到5天的时候内逐渐吸收而颜色变浅,恢复正常。
2.抽血后出现晕血症状如:头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水,待症状缓解后再进行体检。
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