自然殺傷細胞活性臨牀意義
K細胞主要分佈在腹腔滲出液,外周血、脾臟中;NK細胞主要分佈在骨髓、外周血和脾臟中。臨牀主要用於腫瘤、病毒感染、寄生蟲感染、自身免疫和移植免疫等病人,檢測其K、NK細胞殺傷功能,在維持和調節特異性免疫中起重要作用。
自然殺傷細胞活性注意事項:
(1)要求效/靶細胞比為100∶1,若比>100∶1,自然殺傷率不呈對數增加。且標本用量亦大。
(2)標記靶細胞放置時間不宜過久。因隨時間延長死細胞增加,自然釋放率欠準確。
(3)標記的125IUdR濃度要合適,要求125IUdR的放射性濃度為1.11×107Bq/ml,如濃度過低,標記率自然殺傷細胞活性檢查過程:
(1)效靶細胞作用:將分離好的淋巴細胞懸液(效應細胞)和標記的K562細胞(靶細胞)按100∶1的比例加入平底塑料試管中,按表1操作,同時設自然釋放管(作為對照管),每個標本作了3個復管,最後用培養液使每管增至1ml,1500r/min離心,促進效靶細胞結合,置37℃、5%CO2孵箱內孵育18h。
(2)酶促反應:取出孵育試管,棄去各管上清液,剩下的.細胞加一定濃度(2.2g/L)胰蛋白酶和DNA酶各0.1m1,混勻後37℃水浴30min,促使被攻擊的靶細胞釋放125IUdR,隨後各管立即加入0.8mlHank液終止酶促反應。混勻後1500r/min離心2min。
(3)測放射強度和計算:用γ型計數器分別測各管(上清和細胞管)cpm值,按下式計算;
自然殺傷細胞活性不適宜人羣:
造血功能減低的人如白血病、各種貧血、骨髓增生異常綜合症等患者或血小板減少的人抽血時應注意,不宜多抽或頻繁抽血。
自然殺傷細胞活性不良反應與風險:
1.抽血結束後,不要按揉針孔部位,以免造成皮下血腫。如果抽血處有小片青淤,輕微觸痛,請不要慌張,可過24小時後再做熱敷,以促進淤血吸收。一般的小量淤血會在3到5天的時候內逐漸吸收而顏色變淺,恢復正常。
2.抽血後出現暈血症狀如:頭暈、眼花、乏力等應立即平卧、飲少量糖水,待症狀緩解後再進行體檢。
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